ANÁLISE DE FITOTERÁPICOS COMO INIBIDORES DE V-ATPASE EM CÉLULAS TUMORAIS

Abstract

O estudo das propriedades bioquímicas de extratos vegetais consiste numa abordagem importante para o desenvolvimento de novos fitoterápicos. Neste trabalho, é descrita a atividade inibitória de óleos essenciais derivados de terpenóides (citral e alfa pineno) sobre as V-ATPases, bombas de H+ expressas na membrana plasmática de células tumorais, relacionadas com o processo de invasão e aumento do potencial metastático tumoral.Foram usadas linhagens tumorais de melanoma (B16F10 e B16F0) e carcinoma uterino (Hela), e como controle a linhagem de macrófago transformado J774 A1. Nessas células, foram realizados experimentos de microscopia de fluorescência com o fluoróforo laranja de acridina para a localização de compartimentos ácidos; mensuração do grau de crescimento celular em diferentes concentrações do inibidor; atividade enzimática para caracterizar a atividade inibitória na enzima com diferentes concentrações dos terpenóides; curvas de Michaellis-Menten para a caracterização inibitória dos referidos fitoterápicos; e experimentos de medição de pH na presença dos inibidores.Os resultados mostram que tanto o citral quanto o alfa pineno, apresentam atividade inibitória de V-ATPase em células tumorais “in vitro”. Análises ultraestruturais dos compartimentos ácidos evidenciaram que os fitoterápicos promovem uma inibição da compartimentalização nas três concentrações testadas. Os dados de crescimento celular sugerem possível ocorrência de apoptose nas quatro linhagens celulares em resposta ao tratamento com as drogas testadas.Portanto, a inibição de bombas de prótons por estes óleos essenciais e o reflexo desta atividade sobre a proliferação de células neoplásicas ratifica as potencialidades da V-ATPase como novo alvo terapêutico e dos óleos essenciais para o desenvolvimento de terapias anti-câncer inovadoras.